Мы хотим подвести итоги ситуации вместе с вами. С июля 2018 года по сегодняшний день прошло 8 месяцев, и за эти месяцы мы достигли чрезвычайно удовлетворительных результатов. Мы представили исследовательская программа а что касается анализа вакцин, мы можем сделать первый вывод о ситуации с достигнутыми целями, теми, которые находятся на стадии завершения, и теми, которые еще находятся на стадии планирования.

Мы начинаем это обновление, говоря, что анализы по стандарту 2 соединений для каждой вакцины были подтверждены с использованием сертифицированных стандартов контроля с концентрацией порядка микрограмм / мл. Составы, которые мы выбрали, относятся к числу тех, которые известны своим критическим профилем опасности. Мы говорим о кумулятивном количестве, то есть в совокупности между теми, кто подтвержден как идентичность, и теми, которые должны быть идентифицированы, которые могут быть оценены в порядке 50 микрограммов / мл, в отличие от рекомендаций EMA / FDA.

Эти подтверждения дали положительные результаты, поэтому они полностью подтверждают метод анализа! Наблюдаемые загрязнения, вероятно, связаны с явлениями и переменными, связанными с производственным процессом. Во время исследований наблюдалось долговременное изменение этого состава, что приводит к предположению, что существуют процессы, которые трудно контролировать в рамках общего процесса обработки продукта.

Проведенные анализы позволили сделать следующие шаги:

• Оценка соответствия состава, как указано в паспорте вакцины
• Скрининг химических, белковых / пептидных и генетических загрязнений материала
• Подтверждение изучения целевых соединений (химических и белковых) с сертифицированными стандартами контроля

Следующие вакцины были проанализированы "полностью":

• Инфанрикс Гекса - GlaxoSmithKline Biologicals sa
• Приорикс Тетра - ГлаксоСмитКлайн Спа
  
• Гексион - Санофи Пастер Европа
• Гардасил 9 - MSD Vaccins

Эти другие вакцины были проанализированы в качестве первоначального скрининга:

• Вакцина против кори живого BP - Poonawalla Group (Profarma AG, Baar)
• MMR vax Pro - MSD Vaccins, Франция
• ПолиоИнфанрикс - ГлаксоСмитКляйн, Бельгия
• Fluad - Seqirus Srl, Сиена
• Vivotif - PaxVax, Великобритания

Используемые технологии

Исследование было сформулировано на:

Анализ примесей и химических и белковых загрязнений

• Система анализа LC-SACI / ESI-MS, связанная с инновационной платформой SANIST, использовалась как для первоначального скрининга идентификации интересующих вакцин, так и для подтверждения контрольными стандартами с минимальным пределом между нанограммами и микрограммов / доза
• Технология MALDI-TOF-MS была использована для изучения нерастворимых макромолекул, присутствующих в вакцинах

Анализ генетического материала

• Тест на наличие нуклеиновых кислот (ДНК / РНК) человеческого и животного происхождения и микроорганизмов (вирусов, бактерий) с использованием метода секвенирования следующего поколения, который позволил с высокой степенью специфичности и точности количественно определить последовательность генетического материала, содержащегося в вакцинах. рассмотрел

Количественный анализ металлов

• Технология ICP-MS позволила определить количество металлов, присутствующих в вакцинах, с минимальным пределом 5 нг / доза.

Анализ химических и белковых загрязнений

После первоначального скрининга, который выявил сотни химических сигналов в вакцинах, подтверждения были выполнены с использованием стандартных 2 соединений на вакцинус использованием сертифицированных контрольных стандартов, выбранных из тех, которые известны своим профилем критической опасности и неостаточным количеством (таким образом, что они могут считаться компонентами вакцин, поэтому должны быть включены в технический паспорт и определены количественно).

Эти подтверждения дали положительные результаты, поэтому полностью подтверждают метод анализа. На данный момент они были проведены только для двух соединений по чисто экономическим причинам, на самом деле это исследование не является исчерпывающим, потому что оно ограничено значительной стоимостью исследования, но мы решили определить стандарты, которые имеют наибольшее влияние с точки зрения нормативных ограничений, и также верно, что такое тщательное расследование зависит от нас.

Наблюдаемые загрязнения, вероятно, связаны с явлениями и переменными, связанными с производственным процессом. Во время исследований наблюдалось долговременное изменение этого состава, что приводит к предположению, что существуют процессы, которые трудно контролировать в рамках общего процесса обработки продукта. Учитывая обычные аналитические факторы, можно предположить, что концентрация составляет порядка микрограммов / мл. Что касается кумулятивного количества, то можно оценить на основе полуколичественной оценки (поскольку большинство соединений не известны), что загрязняющие вещества имеют порядок 50 мкг / мл. Это важно, потому что руководство EMA / FDA ясно в этом отношении. Загрязнения не должны присутствовать (ниже предела обнаружения) или, если они есть, они должны быть хорошо охарактеризованы и подтверждено применение соответствующих методов для их максимального уменьшения. В нашем случае обнаруженные нами загрязнители не ниже предела обнаружения прибора (нг / мл), и поэтому, по нашему мнению, производитель не применяет какие-либо методы очистки. Что касается наличия случайных вирусов, то проблемы не существует, потому что они должны полностью отсутствовать.

• В ПРОЦЕССЕ - Идет межлабораторный подтверждающий анализ этих соединений.
  Соединения, определенные стандартами, будут подтверждены с помощью той же технологии в других лабораториях. Одна из целей, которые мы поставили перед собой, состоит в том, чтобы координировать эти действия также при поддержке международных ассоциаций.
• В ПРОЦЕССЕ - Изучение кинетики осаждения связанных с алюминием антигенов.

Метагеномный анализ

• В ПРОЦЕССЕ - Анализ с дополнительными стандартами контроля ДНК и РНК другой партии на вакцину.
  С самого начала этого проекта нам стало ясно, что анализы, чтобы соответствовать необходимым требованиям повторяемости и точности данных, должны проводиться с использованием передовых контрольно-измерительных приборов и мониторинга любых различий между различными партиями. Поскольку мы приступаем к расследованиям, другие партии постоянно анализируются, очевидно, ограничены стоимостью и доступностью продуктов.
• В ПРОЦЕССЕ - Анализ секвенирования генома ДНК плода из линии клеток MRC-5.
  Уже при первом отборе у нас была возможность стандартно подтвердить, что использовались диплоидные линии MRC-5, как указано в техническом паспорте. Мы хотим углубить изучение этой клеточной линии также в силу того факта, что она присутствует в значительных количествах и абсолютно значительных размеров.
• В ПРОЦЕССЕ - Изучение минорных вариантов (квази-видов) вирусов кори, эпидемического паротита и краснухи.
  По сравнению с первым отчетом июля 2018 года (https://goo.gl/cSspVH) мы заказали углубленное изучение минорных вариантов, поскольку мутации аттенуированных вакцинных вирусов были не единственными найденными. Этот элемент также вызывает огромные сомнения в эффективности и безопасности вакцины. Результат займет больше времени, чем другие отчеты, потому что проверка последовательностей различных мутантов должна быть сделана вручную.
• В ПРОЦЕССЕ - Межлабораторный подтверждающий анализ
  Мы определили зарубежные и национальные лаборатории, в которые мы заказали тиражирование анализов по стандарту. Этот результат будет доступен в ближайшее время.

Проекты в стадии оценки

Исследование эффективности вакцинных антигенов: это исследование должно проводиться в центре, аккредитованном регулирующими органами для доклинического исследования вакцин. Цель состоит в том, чтобы проверить, способны ли вакцинные антигены продуцировать или связываться со специфическими антителами (теоретически предполагается, что эти антитела являются защитными, но этот анализ не позволяет продемонстрировать, что вакцина способна защитить от заболевания). Стоимость этого шага может быть значительной, поэтому проект пока является гипотетическим.

Скачать: CORVELVA-отчет-о-результаты-ottenuti.pdf