Determinazione delle tracce e dell'origine dell'impurezza della formaldeide nel vaccino coniugato Neisseria meningitidis A/C/Y/W-135-DT formulato in PBS isotonico acquoso 1× mediante un metodo C18-UPLC migliorato

La capacità di misurare e segnalare con precisione le tracce di impurità residue di formaldeide in un prodotto vaccinale non solo è fondamentale per il rilascio del prodotto, ma è anche un requisito normativo. In molte procedure di produzione di vaccini batterici o virali, la formaldeide viene utilizzata in una fase di inattivazione delle colture vive o in una fase di de-tossificazione delle proteine o in entrambe. Qui viene riportato un metodo C18-UPLC convalidato e migliorato (sviluppato sulla base di un metodo HPLC C-8 precedentemente pubblicato) per determinare le tracce di impurità del processo della formaldeide in un vaccino coniugato di Neisseria meningitidis A/C/Y/W-135-DT in forma liquida formulato in PBS isotonico acquoso 1×. La colonna UPLC C-18 e le condizioni descritte hanno risolto distintamente l'addotto 2,4-DNPH-HCHO dal 2,4-DNPH non reagito, come rilevato dal rivelatore TUV a 360 nm. Questo metodo si è dimostrato compatibile con la formulazione del PBS ed estremamente sensibile (con un limite di quantificazione di 0,05 ppm) e ha contribuito a determinare le fonti di contaminazione da formaldeide valutando i materiali in-process come analisi track-down. I livelli finali di nanogrammi di formaldeide nel vaccino formulato in fiale monodose provenivano principalmente dalla proteina carrier del tossoide difterico utilizzata nella produzione del vaccino coniugato, mentre il contributo relativo del polisaccaride API era minimo.