L'apoptosi indotta dal thimerosal nelle cellule mioblastiche C2C12 di topo avviene attraverso la soppressione della via PI3K/Akt/survivina

BACKGROUND - Il thimerosal, un conservante contenente mercurio, è uno dei conservanti più utilizzati e si trova in una varietà di prodotti biologici. Le preoccupazioni sulla sua possibile tossicità sono riemerse di recente a causa del suo utilizzo nei vaccini. È stato inoltre riferito che il thimerosal è marcatamente citotossico per il tessuto neurale. Tuttavia, si sa poco della tossicità indotta dal thimerosal nel tessuto muscolare. Pertanto, abbiamo studiato l'effetto citotossico del thimerosal e i suoi possibili meccanismi sulle cellule mioblastiche C2C12 di topo.

METODOLOGIA/ RISULTATI PRINCIPALI - Lo studio ha dimostrato che le cellule di mioblasti C2C12 hanno subito un'inibizione della proliferazione e dell'apoptosi dopo l'esposizione al thimerosal (125-500 nM) per 24, 48 e 72 ore. Il thimerosal ha causato l'arresto della fase S e ha indotto l'apoptosi, come valutato dall'analisi citometrica di flusso, dalla colorazione Hoechst e dall'immunoblotting. I dati hanno rivelato che il thimerosal può innescare la fuoriuscita del citocromo c dai mitocondri, seguita dal clivaggio della caspasi-9 e della caspasi-3, e che un inibitore della caspasi può sopprimere l'apoptosi indotta dal thimerosal. Il thimerosal ha inibito la fosforilazione di Akt (ser473) e l'espressione di survivin. La wortmannina, un inibitore di PI3K, ha inibito l'attività di Akt e diminuito l'espressione di survivin, con conseguente aumento dell'apoptosi indotta dal thimerosal nelle cellule C2C12, mentre l'attivazione della via PI3K/Akt da parte di mIGF-I (50 ng/ml) ha aumentato l'espressione di survivin e attenuato l'apoptosi. Inoltre, l'inibizione dell'espressione della survivin mediante siRNA ha aumentato l'apoptosi cellulare indotta dal thimerosal, mentre la sovraespressione della survivin ha impedito l'apoptosi indotta dal thimerosal. Nel complesso, i dati dimostrano che la via PI3K/Akt/survivin svolge un ruolo importante nell'apoptosi indotta dal thimerosal nelle cellule C2C12.

CONCLUSIONI/SIGNIFICATO - I nostri risultati suggeriscono che nelle cellule di mioblasti C2C12, il thimerosal induce l'arresto della fase S e infine causa l'apoptosi attraverso l'inibizione della segnalazione di PI3K/Akt/survivin seguita dall'attivazione della via apoptotica mitocondriale.