Relazione epidemiologica e molecolare tra la produzione di vaccini e la prevalenza del disturbo dello spettro autistico

Obiettivi: Valutare le conseguenze sulla salute pubblica dei vaccini prodotti con linee cellulari fetali che contengono frammenti residui di DNA fetale umano utilizzando approcci di laboratorio ed ecologici, tra cui la statistica, la biologia molecolare e la genomica.

Metodo: I dati sulla copertura MMR e sulla prevalenza dei disturbi dell'autismo o dello spettro autistico in Norvegia, Svezia e Regno Unito sono stati ottenuti da siti web pubblici e governativi e da articoli pubblicati con revisione paritaria. Dal punto di vista biologico, sono state misurate e quantificate le dimensioni e la quantità di DNA fetale contaminante in Meruvax II e Havrix, nonché la propensione di varie linee cellulari all'assorbimento cellulare e nucleare di frammenti di DNA umano primitivo, utilizzando l'elettroforesi su gel, la microscopia a fluorescenza e la fluorimetria. Infine, l'analisi genomica ha identificato i siti specifici in cui è più probabile che si verifichi l'integrazione del frammento di DNA fetale nel genoma del bambino.

Risultati: La copertura media della MMR nei tre Paesi è scesa al di sotto del 90% dopo la famigerata pubblicazione di Wakefield del 1998, ma ha iniziato a riprendersi lentamente dopo il 2001 fino a raggiungere nuovamente una copertura superiore al 90% nel 2004. Nello stesso periodo, la prevalenza media dei disturbi dello spettro autistico nel Regno Unito, in Norvegia e in Svezia è diminuita notevolmente dopo l'anno di nascita 1998 ed è gradualmente aumentata di nuovo dopo l'anno di nascita 2000. La media del DNA a singolo e doppio filamento in Meruvax II è stata rispettivamente di 142,05 ng/vial e 35,00 ng/vial, e di 276,00 ng/vial e 35,74 ng/vial in Havrix. La dimensione dei frammenti di DNA fetale in Meruvax II era di circa 215 coppie di basi. Si è verificata una captazione spontanea del DNA cellulare e nucleare nelle cellule HFF1 e NCCIT. I geni che sono stati collegati all'autismo (geni associati all'autismo; AAG) presentano una maggiore suscettibilità agli insulti alla stabilità genomica rispetto al gruppo di tutti i geni contenuti nel genoma umano. Degli AAG del cromosoma X, 15 su 19 presentano motivi di rottura del doppio filamento a meno di 100 kilobasi dal centro di un hotspot di ricombinazione meiotica situato all'interno di un esone.

Conclusioni: I vaccini prodotti in linee cellulari fetali umane contengono livelli inaccettabilmente elevati di frammenti di DNA fetale contaminanti. Il genoma umano contiene naturalmente regioni suscettibili alla formazione di rotture a doppio filamento e alla mutagenesi inserzionale del DNA. L'"allarme Wakefield" ha creato un esperimento naturale che potrebbe dimostrare una relazione causale tra i vaccini prodotti con linee cellulari fetali e la prevalenza di ASD.