Riduzione di spiked di circovirus suino durante la produzione di un vaccino derivato da cellule Vero

Il circovirus-1 dei suini (PCV1) è stato recentemente identificato come contaminante nei vaccini vivi di Rotavirus, probabilmente a causa della tripsina suina contaminata. L'evento ha innescato lo sviluppo di nuove linee guida normative sull'uso della tripsina suina, che devono garantire che le linee cellulari e la tripsina suina in uso siano prive di PCV1. Inoltre, i processi di produzione di prodotti biologici diversi dai vaccini vivi includono fasi di eliminazione del virus che possono prevenire e mitigare qualsiasi potenziale contaminazione virale del prodotto. In questo lavoro, sono stati utilizzati modelli artificiali in scala ridotta per il processo di produzione di un vaccino inattivato contro il virus dell'influenza pandemica per studiare l'inattivazione del PCV1 e del parvovirus suino (PPV), fisicamente correlato, mediante trattamento con formalina e raggi ultravioletti-C (UV-C) e la rimozione mediante ultracentrifugazione a gradiente di saccarosio. È stato realizzato un saggio di infettività del PCV1, utilizzando una lettura dell'infettività mediante PCR in tempo reale. Il trattamento con formalina (0,05% per 48 ore) ha mostrato una sostanziale inattivazione sia per il PCV1 che per il PPV, con fattori di riduzione rispettivamente di 3,0log10 e 6,8log10, mentre il trattamento con UV-C ha portato alla completa inattivazione del PPV (≥5,9log10) già a una dose di 13mJ/cm, ma solo a 1,7log10 a 24mJ/cm(2) per il PCV1. I risultati dell'inattivazione UV-C con il PPV sono stati confermati utilizzando il virus minuto del topo (MVM), indicando che i parvovirus sono molto più sensibili agli UV-C rispetto al PCV1. Anche l'ultracentrifugazione a gradiente di densità con saccarosio ha contribuito alla clearance del PCV1 con un fattore di riduzione di 2log10. Il trattamento a basso pH durante la produzione di tripsina procinica è stato studiato e ha mostrato un'efficace inattivazione sia per il PCV1 (4,5log10) che per il PPV (6,4log10). In conclusione, il PCV1 in generale sembra essere più resistente all'inattivazione del virus rispetto al PPV. Tuttavia, il processo di produzione del vaccino antinfluenzale pandemico inattivato prevede una robusta riduzione del virus, oltre ai test già implementati per il PCV1 per evitare qualsiasi contaminazione.