Rilevamento e caratterizzazione di contaminazioni da pestivirus in vaccini virali vivi umani

In considerazione dell'uso di siero fetale di vitello (FCS) potenzialmente contaminato nelle colture cellulari, i pestivirus possono essere presenti nei vaccini virali vivi. Trentasei lotti di vaccini umani vivi virali prodotti da tre produttori sono stati analizzati per verificare la presenza di pestivirus. L'RNA del virus della diarrea virale bovina (BVDV) è stato rilevato nel 33% dei lotti di vaccino. Tutti i risultati positivi sono stati causati dal componente della parotite di un singolo produttore. Sono state determinate le sequenze parziali della regione 5' non tradotta dell'RNA virale del BVD. Le sequenze erano strettamente correlate a quelle del ceppo NADL di BVDV. La quantità di RNA di BVDV nei vaccini è stata determinata mediante RT-PCR in tempo reale utilizzando il LightCycler. Nei campioni di vaccino sono state riscontrate copie di RNA per dose comprese tra 3,3*10(2) e 6,2*10(5). Inoltre, sono stati effettuati test colturali con FCS e cellule diploidi umane utilizzate nella produzione di vaccini del produttore i cui vaccini sono risultati positivi alla PCR. Tutti i tentativi di rilevare l'antigene del virus nelle cellule diploidi umane MRC-5 o di infettare queste cellule con BVDV sono falliti. Ciò suggerisce che l'RNA di BVDV rilevato nei vaccini virali vivi umani rappresenti un trasporto passivo di BVDV da FCS contaminato piuttosto che una replicazione attiva del virus nelle cellule diploidi umane. I nostri risultati indicano che la contaminazione con BVDV delle FCS utilizzate nella produzione di vaccini non sembra essere un problema immediato per la salute umana. Inoltre, i nostri risultati indicano che l'irradiazione gamma di FCS distrugge le particelle di BVDV ed è anche efficace nel prevenire la presenza di RNA di BVDV nei vaccini.