I vaccini virali e i substrati cellulari utilizzati per la loro produzione sono sottoposti a test per la ricerca di agenti avventizi, compresi i virus, contaminati. Alcuni dei metodi compendiali (in vivo e in vitro in coltura cellulare) sono stati stabiliti a metà del XX secolo. Questi metodi non sono stati sottoposti all'attuale convalida dei saggi, come invece dovrebbero fare i nuovi metodi. Questo studio è stato intrapreso per fornire una visione dell'ampiezza (selettività) e della sensibilità (limite di rilevazione) dei metodi di routine, due parametri di validazione. Sono stati preparati e caratterizzati sedici stock virali. Questi stock sono stati testati in diluizioni seriali con i metodi di routine per stabilire quali virus sono stati rilevati da quali metodi e al di sopra del limite di rilevazione. Sedici dei sedici virus sono stati rilevati in vitro, anche se uno (virus della diarrea virale bovina) richiedeva condizioni speciali per essere rilevato e un altro (virus della rosolia) è stato rilevato con bassa sensibilità. Molti sono stati rilevati a livelli inferiori a 1 TCID50 o PFU (nella maggior parte dei casi i titoli sono stati stabiliti sulla linea cellulare di produzione). Al contrario, in vivo sono stati rilevati solo 6/11 virus, e 4 di questi sono stati rilevati solo a quantità di uno o più log superiori a 1 TCID50 o PFU. Solo il virus dell'influenza e il virus della stomatite vescicolare sono stati rilevati in quantità inferiori in vivo rispetto a quelli in vitro. Dato l'invito a ridurre, perfezionare o sostituire (3R) l'uso degli animali nei test di sicurezza dei prodotti e l'emergere di nuove tecnologie per il rilevamento dei virus, sembra giustificato un riesame delle attuali strategie di test sui virus avventizi. Vengono proposti alcuni suggerimenti per il futuro.